Validation and stability of underivatized thyrostatics in bovine urine by liquid chromatography with a triple quadrupole detector
Keywords:
Thyrostatics, Urine, Validation, Stability, UHPLC-MS/MSAbstract
Tyrostatics are pharmacologically active substances banned in cattle and other species intended for consumption by the European Union according to Council Directive 96/22/EC. The following work presents the validation of a detection and confirmation method for the routine analysis of tyrostatics in urine without derivatization, by high performance liquid chromatography coupled to a triple quadrupole mass spectrometer (LC-MS/MS), by denaturing the sample and liquid-liquid extraction with ethyl acetate. It is a rapid and simple analytical method in the range of 5 - 20 µg L-1 to quantify thiouracil, phenyl thiouracil, methyl thiouracil, propyl thiouracil and tapazol. The method meets the analytical criteria with regression coefficients (R2)>0.995 for all analytes studied, decision limit (CCα) in the range of 0.4 to 1.8 µg L-1 and detection capability (CCβ) between 1.0 and 2.8 µg L-1. This method was validated according to SENASA (Servicio Nacional de Sanidad y Calidad Agroalimentaria) legislation, which is in accordance with EU (European Union) validation criteria according to Commission Decision 2002/657/EC.
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